DESARROLLO DE UN INMUNOENSAYO LIGADO A ENZIMA (ELISA) PARA LA DETECCIÓN DE INFECCIONES HUMANAS CON ARBOVIRUS CO-CIRCULANTES EN EL SUR DE COLOMBIA

Abstract

Las arbovirosis agrupan a las enfermedades virales transmitidas por vectores. Dentro de estas se encuentran los flavivirus y a estos pertenecen las infecciones con los virus del Dengue (DENV), Zika (ZIKV). La proteína no estructural 1 (NS1) es una proteína importante secretada por las células infectadas con el virus e interactúa con el huésped. Además, NS1 es una proteína soluble altamente secretada, lo que sugiere que el virus puede escapar del sistema inmunológico para fortalecer las interacciones con el huésped. Más importante aún, como es el antígeno principal, NS1 puede inducir la producción de anticuerpos, que son importantes en el diagnóstico temprano de marcadores virales. Actualmente, la detección temprana del ZIKV depende en gran medida de la proteína NS1. La detección del antígeno ZIKV para el desarrollo de un método de diagnóstico aún no se ha reportado con precisión, por lo que el desarrollo de un inmunoensayo para la detección de ZIKV basado en un anticuerpo monoclonal específico (mAb) es absolutamente necesario. Se realizó un inmunoensayo ligado a enzima (ELISA) tipo sándwich para la detección de NS1 de ZIKV utilizando diferentes anticuerpos monoclonales específicos contra este virus a distintas concentraciones y así lograr las mejores condiciones para realizar este ensayo y obtener los mejores resultados. Se encontró que los pares de anticuerpos monoclonales ideales para la detección de la proteína no estructural 1 (NS1) del ZIKV fueron el 680 y 644 ambos con una concentración de 2ug/ml que demostró ser la más óptima. La concentración saturante al momento de la detección fue de 200ng de NS1. Para terminar se obtuvo la curva de detección de la proteína NS1 a diferentes concentraciones de esta obteniendo buenos niveles de detección que se encuentran entre los 5-7 nanogramos.